ကာဘာပင်နမ် ခုခံမှု ဗီဇ (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
ထုတ်ကုန်အမည်
HWTS-OT045 Carbapenem Resistance Gene (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) ထောက်လှမ်းကိရိယာ (Fluorescence PCR)
ကူးစက်ရောဂါဗေဒ
Carbapenem ပဋိဇီဝဆေးများသည် အကျယ်ပြန့်ဆုံး ဘက်တီးရီးယား ရောင်စဉ် နှင့် အပြင်းထန်ဆုံး ဘက်တီးရီးယား ဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက် ပါရှိသော atypical β-lactam ပဋိဇီဝဆေးများ ဖြစ်သည်။β-lactamase တွင် တည်ငြိမ်မှုနှင့် အဆိပ်သင့်မှု နည်းပါးသောကြောင့်၊ ၎င်းသည် ပြင်းထန်ဘက်တီးရီးယားကူးစက်မှုကို ကုသရန်အတွက် အရေးကြီးဆုံး ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်ဆေးများထဲမှ တစ်ခု ဖြစ်လာခဲ့သည်။Carbapenems များသည် plasmid-mediated extended-spectrum β-lactamases (ESBLs)၊ chromosomes နှင့် plasmid-mediated cephalosporinases (AmpC enzymes) များအတွက် အလွန်တည်ငြိမ်ပါသည်။
လက်ပံတန်း
| PCR-ရောနှော ၁ | PCR-Mix ၂ | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှု | အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှု |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
နည်းပညာဆိုင်ရာ ကန့်သတ်ချက်များ
| သိုလှောင်မှု | ≤-18 ℃ |
| စင်ဘဝ | ၁၂ လ |
| နမူနာအမျိုးအစား | သလိပ်၊ သန့်စင်သော ကိုလိုနီများ၊ စအိုဝ စုတ်တံ |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5.0% |
| LoD | 103CFU/ml |
| တိကျမှု | က) စက်ကိရိယာသည် စံသတ်မှတ်ထားသော ကုမ္ပဏီ၏ အနုတ်လက္ခဏာ ကိုးကားချက်များကို ရှာဖွေတွေ့ရှိပြီး ရလဒ်များသည် သက်ဆိုင်ရာ ကိုးကားချက်များ၏ လိုအပ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ ခ) အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုစမ်းသပ်မှု၏ရလဒ်များက ဤကိရိယာသည် Klebsiella pneumoniae၊ Acinetobacter baumannii၊ Pseudomonas aeruginosa၊ Streptococcus pneumoniae၊ Neisseria meningitidis၊ Staphylococcus aureemella in ဘက်တီးရီးယား junii၊ Acinetobacter haemolyticus၊ Legionella pneumophila၊ Escherichia coli၊ Pseudomonas fluorescens၊ Candida albicans၊ Chlamydia pneumoniae၊ Respiratory adenovirus၊ Enterococcus သို့မဟုတ် အခြားသော ဆေးယဉ်မျိုးဗီဇ CTX EM၊ mecA၊ စသည်တို့ပါရှိသော နမူနာများ ဂ) Anti-interference- Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin ကို နှောင့်ယှက်စမ်းသပ်ရန်အတွက် ရွေးချယ်ထားပြီး ရလဒ်များက အထက်ဖော်ပြပါ နှောင့်ယှက်သည့် တုံ့ပြန်မှုများတွင် အနှောင့်အယှက် မရှိကြောင်း၊ carbapenem ခုခံမှုဗီဇ KPC၊ NDM၊ OXA48၊ OXA23၊ VIM နှင့် IMP တို့ကို ရှာဖွေတွေ့ရှိရန်။ |
| အသုံးပြုနိုင်သော တူရိယာများ | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR စနစ်များ QuantStudio®5 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ်များ SLAN-96P အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ်များ (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR စနစ် LineGene 9600 Plus အား အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR ထောက်လှမ်းမှုစနစ် (FQD-96A၊HangzhouBioer နည်းပညာ) MA-6000 အချိန်နှင့်တပြေးညီ အရေအတွက် အပူစက်စက် (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Real-Time PCR စနစ် BioRad CFX Opus 96 Real-Time PCR စနစ် |
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
ရွေးချယ်မှု ၁။
အကြံပြုထားသည့် ထုတ်ယူသည့် ဓာတ်ပစ္စည်းများ- Macro & Micro-Test အထွေထွေ DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50၊ HWTS-3019-32၊ HWTS-3019-48၊ HWTS-3019-96) (Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. မှ Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) ဖြင့်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ ပုံမှန်ဆားရည် 200μL ထည့်ပါ။ thallus မိုးရွာသည်။နောက်ဆက်တွဲအဆင့်များသည် ထုတ်ယူခြင်းအတွက် ညွှန်ကြားချက်များကို လိုက်နာသင့်ပြီး အကြံပြုထားသော elution ပမာဏမှာ ဖြစ်သည်။100μL
ရွေးချယ်မှု ၂။
Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. မှ Nucleic Acid Extraction သို့မဟုတ် Purification Reagent (YDP302) ကို အသုံးပြုရန် ညွှန်ကြားချက်၏ အဆင့် 2 နှင့်အညီ ထုတ်ယူခြင်းကို တင်းတင်းကျပ်ကျပ် စတင်သင့်သည် ( thallus precipitate တွင် ကြားခံ GA ၏ 200μL ကို ထည့်ပါ။ , နှင့် thallus လုံးဝရပ်ဆိုင်းသွားသည်အထိလှုပ်ပါ။)ကူးယူမှုအတွက် RNase/DNase အခမဲ့ရေကို သုံးပါ၊ အကြံပြုထားသည့် elution ပမာဏသည် 100μL ဖြစ်သည်။
ရွေးချယ်မှု ၃။
အကြံပြုထားသည့် ထုတ်ယူသည့် ဓာတ်ပစ္စည်းများ- Macro နှင့် Micro-Test နမူနာ ဖြန့်ချိသည့် ဓာတ်ပစ္စည်းများ။အထက်ဖော်ပြပါ ကုသထားသော thallus precipitate တွင် ပုံမှန်ဆားရည် 1mL ထည့်ပြီး သလိပ်နမူနာကို 13000r/min ဖြင့် 5 မိနစ်ကြာ centrifuged လုပ်ပြီး supernatant ကို စွန့်ပစ်ပါ (supernatant 10-20µL ထားရှိပါ)။သန့်စင်သော colony နှင့် rectal swab အတွက်၊ အထက်ဖော်ပြပါ ကုသထားသော thallus precipitate သို့ တိုက်ရိုက် 50μL နမူနာ ထုတ်လွှတ်သည့် ဓါတ်ကို ပေါင်းထည့်ကာ အသုံးပြုရန်အတွက် ညွှန်ကြားချက်အတိုင်း နောက်ဆက်တွဲ အဆင့်များကို ထုတ်ယူရပါမည်။
