ကာဘာပီနမ် ခုခံမှု မျိုးဗီဇ (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
ထုတ်ကုန်အမည်
HWTS-OT045 Carbapenem Resistance Gene (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) ထောက်လှမ်းကိရိယာ (Fluorescence PCR)
ကူးစက်ရောဂါဗေဒ
ကာဘာပီနမ် ပဋိဇီဝဆေးများသည် အကျယ်ပြန့်ဆုံးသော ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်ဆေးရောင်စဉ်နှင့် အပြင်းထန်ဆုံး ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်အာနိသင်ရှိသော ပုံမှန်မဟုတ်သော β-lactam ပဋိဇီဝဆေးများဖြစ်သည်။ β-lactamase အပေါ် တည်ငြိမ်မှုနှင့် အဆိပ်အတောက်နည်းပါးမှုကြောင့် ၎င်းသည် ပြင်းထန်သော ဘက်တီးရီးယားပိုးဝင်ခြင်းများကို ကုသရန်အတွက် အရေးကြီးဆုံး ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်ဆေးများထဲမှ တစ်ခုဖြစ်လာခဲ့သည်။ ကာဘာပီနမ်များသည် plasmid-mediated extended-spectrum β-lactamases (ESBLs)၊ ခရိုမိုဆုမ်းများနှင့် plasmid-mediated cephalosporinases (AmpC enzymes) များအပေါ် အလွန်တည်ငြိမ်မှုရှိသည်။
ချန်နယ်
| PCR-Mix ၁ | PCR-Mix ၂ | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှု | အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှု |
| CY5 | NDM | ကေပီစီ |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
နည်းပညာဆိုင်ရာ ကန့်သတ်ချက်များ
| သိုလှောင်မှု | ≤-၁၈ ℃ |
| သက်တမ်း | ၁၂ လ |
| နမူနာအမျိုးအစား | သလိပ်၊ သန့်စင်သော အူမကြီးများ၊ စအိုတို့ဖတ် |
| Ct | ≤၃၆ |
| CV | ≤၅.၀% |
| လိုဒီ | 103CFU/မီလီလီတာ |
| တိကျမှု | (က) ဤကိရိယာသည် စံသတ်မှတ်ထားသော ကုမ္ပဏီ၏ အနုတ်လက္ခဏာဆောင်သော ရည်ညွှန်းချက်များကို ထောက်လှမ်းပြီး ရလဒ်များသည် သက်ဆိုင်ရာ ရည်ညွှန်းချက်များ၏ လိုအပ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ (ခ) cross-reactivity test ၏ရလဒ်များအရ ဤ kit သည် Klebsiella pneumoniae၊ Acinetobacter baumannii၊ Pseudomonas aeruginosa၊ Streptococcus pneumoniae၊ Neisseria meningitidis၊ Staphylococcus aureus၊ Klebsiella oxytoca၊ Haemophilus influenzae၊ Acinetobacter junii၊ Acinetobacter haemolyticus၊ Legionella pneumophila၊ Escherichia coli၊ Pseudomonas fluorescens၊ Candida albicans၊ Chlamydia pneumoniae၊ Respiratory adenovirus၊ Enterococcus ကဲ့သို့သော အခြားဆေးယဉ်ပါးသော မျိုးဗီဇများပါ၀င်သည့် နမူနာများနှင့် cross reaction မရှိကြောင်း ပြသထားသည်။ (ဂ) အနှောင့်အယှက်ကင်းခြင်း- Mucin၊ Minocycline၊ Gentamicin၊ Clindamycin၊ Imipenem၊ Cefoperazone၊ Meropenem၊ Ciprofloxacin Hydrochloride၊ Levofloxacin၊ Clavulanic acid၊ Roxithromycin တို့ကို အနှောင့်အယှက်စမ်းသပ်မှုအတွက် ရွေးချယ်ခဲ့ပြီး ရလဒ်များအရ အထက်ဖော်ပြပါ အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေသော အရာများသည် carbapenem ခံနိုင်ရည်ရှိသော မျိုးဗီဇများဖြစ်သည့် KPC၊ NDM၊ OXA48၊ OXA23၊ VIM နှင့် IMP တို့ကို ထောက်လှမ်းရာတွင် အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေသော တုံ့ပြန်မှုမရှိကြောင်း ပြသနေသည်။ |
| သက်ဆိုင်သောတူရိယာများ | Applied Biosystems 7500 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ်များ QuantStudio®5 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ်များ SLAN-96P အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ်များ (Hongshi ဆေးဘက်ဆိုင်ရာနည်းပညာကုမ္ပဏီလီမိတက်) LightCycler®480 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ် LineGene 9600 Plus အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR ထောက်လှမ်းစနစ် (FQD-96A၊ဟန်ကျိုးဇီဝနည်းပညာ) MA-6000 အချိန်နှင့်တပြေးညီ ပမာဏဆိုင်ရာ အပူလည်ပတ်စက် (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ် BioRad CFX Opus 96 အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR စနစ် |
အလုပ်စီးဆင်းမှု
ရွေးချယ်မှု ၁။
အကြံပြုထားသော ထုတ်ယူမှု reagent: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-၅၀၊ HWTS-၃၀၁9-၃၂၊ HWTS-၃၀၁9-၄၈၊ HWTS-၃၀၁9-၉၆) (၎င်းကို Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. မှ Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B) နှင့်အတူ အသုံးပြုနိုင်သည်။ thallus precipitate ထဲသို့ normal saline 200μL ထည့်ပါ။ နောက်ဆက်တွဲအဆင့်များသည် ထုတ်ယူခြင်းအတွက် ညွှန်ကြားချက်များကို လိုက်နာသင့်ပြီး အကြံပြုထားသော elution ပမာဏသည်10၀ မိုက်ခရိုလီတာ။
ရွေးချယ်မှု ၂။
အကြံပြုထားသော ထုတ်ယူမှု ဓါတ်ကူပစ္စည်း- Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd မှ Nucleic Acid ထုတ်ယူခြင်း သို့မဟုတ် သန့်စင်ခြင်း ဓါတ်ကူပစ္စည်း (YDP302)။ ထုတ်ယူခြင်းကို အသုံးပြုရန် ညွှန်ကြားချက်၏ အဆင့် ၂ နှင့်အညီ တင်းကြပ်စွာ စတင်သင့်သည် (buffer GA 200μL ကို thallus အနည်အနှစ်ထဲသို့ထည့်ပြီး thallus လုံးဝဆိုင်းငံ့သွားသည်အထိ လှုပ်ပါ)။ elution အတွက် RNase/DNase ကင်းစင်သောရေကို အသုံးပြုပါ၊ အကြံပြုထားသော elution ပမာဏမှာ 100μL ဖြစ်သည်။
ရွေးချယ်မှု ၃။
အကြံပြုထားသော ထုတ်ယူမှု reagent- Macro & Micro-Test Sample Release Reagent။ သလိပ်နမူနာကို အထက်ဖော်ပြပါ ကုသထားသော thallus precipitate ထဲသို့ normal saline 1 mL ထည့်၍ ဆေးကြောရန် လိုအပ်ပြီး 13000r/min တွင် 5 မိနစ်ကြာ centrifuge လုပ်ကာ supernatant ကို စွန့်ပစ်ရမည် (supernatant 10-20µL သိမ်းဆည်းပါ)။ သန့်စင်သော colony နှင့် rectal swab အတွက် အထက်ဖော်ပြပါ ကုသထားသော thallus precipitate ထဲသို့ နမူနာထုတ်လွှတ်မှု reagent 50μL ကို တိုက်ရိုက်ထည့်ပြီး နောက်ဆက်တွဲအဆင့်များကို အသုံးပြုပုံညွှန်ကြားချက်အတိုင်း ထုတ်ယူသင့်သည်။
