KRAS 8 မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုများ ထောက်လှမ်းခြင်းကိရိယာ (Fluorescence PCR)-RUO
ထုတ်ကုန်အမည်
KRAS 8 မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုများ ထောက်လှမ်းခြင်းကိရိယာ (Fluorescence PCR)-RUO
ကူးစက်ရောဂါဗေဒ
KRAS မျိုးဗီဇတွင် အမှတ်စဉ်ပြောင်းလဲမှုများကို လူသားအကျိတ်အမျိုးအစားအများအပြားတွင် တွေ့ရှိရပြီး အကျိတ်တွင် ၁၇% မှ ၂၅% ခန့် မျိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုနှုန်း၊ အဆုတ်ကင်ဆာလူနာများတွင် မျိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုနှုန်း ၁၅% မှ ၃၀%၊ အူမကြီးကင်ဆာလူနာများတွင် မျိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုနှုန်း ၂၀% မှ ၅၀% အထိ တွေ့ရှိရလေ့ရှိသည်။ K-ras မျိုးဗီဇမှ encode လုပ်ထားသော P21 ပရိုတင်းသည် EGFR အချက်ပြလမ်းကြောင်း၏ အောက်ဘက်တွင် တည်ရှိသောကြောင့်၊ K-ras မျိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုပြီးနောက်၊ အောက်ဘက်အချက်ပြလမ်းကြောင်းသည် အမြဲတမ်း အသက်ဝင်ပြီး EGFR ပေါ်ရှိ အထက်ပိုင်းပစ်မှတ်ထားသော ဆေးဝါးများ၏ သက်ရောက်မှုမရှိဘဲ ဆဲလ်များ၏ အဆက်မပြတ် ကင်ဆာပွားများမှုကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။ K-ras မျိုးဗီဇတွင် မျိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုများသည် ယေဘုယျအားဖြင့် အဆုတ်ကင်ဆာလူနာများတွင် EGFR tyrosine kinase inhibitors များကို ခံနိုင်ရည်ရှိစေပြီး အူမကြီးကင်ဆာလူနာများတွင် anti-EGFR antibody ဆေးဝါးများကို ခံနိုင်ရည်ရှိစေသည် [၁၊ ၂၊ ၃]။ ၂၀၀၈ ခုနှစ်တွင် အမျိုးသားဘက်စုံကင်ဆာကွန်ရက် (NCCN) သည် အူမကြီးကင်ဆာအတွက် လက်တွေ့လမ်းညွှန်ချက်တစ်ရပ်ကို ထုတ်ပြန်ခဲ့ပြီး K-ras ကို အသက်ဝင်စေသော မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုနေရာများသည် exon 2 ၏ codons 12 နှင့် 13 တွင် အဓိကတည်ရှိကြောင်း ထောက်ပြခဲ့ပြီး အဆင့်မြင့် metastatic colorectal ကင်ဆာရှိသော လူနာအားလုံးကို ကုသမှုမပြုလုပ်မီ K-ras မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုကို စစ်ဆေးနိုင်ကြောင်း အကြံပြုထားသည်[4]။ ထို့ကြောင့် K-ras မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုကို မြန်ဆန်တိကျစွာ ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်းသည် လက်တွေ့ဆေးဝါးလမ်းညွှန်ချက်တွင် အလွန်အရေးပါသည်။ ဤကိရိယာသည် မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုအခြေအနေကို အရည်အသွေးအကဲဖြတ်ရန်အတွက် DNA ကို ထောက်လှမ်းနမူနာအဖြစ် အသုံးပြုပြီး ၎င်းသည် ဆရာဝန်များအား အူမကြီးကင်ဆာ၊ အဆုတ်ကင်ဆာနှင့် ပစ်မှတ်ထားဆေးဝါးများမှ အကျိုးကျေးဇူးရရှိသော အခြားအကျိတ်လူနာများကို စစ်ဆေးရာတွင် အထောက်အကူဖြစ်စေနိုင်သည်။ ကိရိယာ၏ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များသည် ဆေးခန်းကိုးကားရန်အတွက်သာဖြစ်ပြီး လူနာများကို တစ်ဦးချင်းစီကုသမှုအတွက် တစ်ခုတည်းသောအခြေခံအဖြစ် အသုံးမပြုသင့်ပါ။ ဆရာဝန်များသည် လူနာ၏အခြေအနေ၊ ဆေးဝါးညွှန်ပြချက်များ၊ ကုသမှုတုံ့ပြန်မှုနှင့် အခြားဓာတ်ခွဲခန်းစမ်းသပ်မှုညွှန်းကိန်းများကဲ့သို့သော အချက်များအပေါ် အခြေခံ၍ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များအပေါ် ပြည့်စုံသောဆုံးဖြတ်ချက်များချသင့်သည်။
နည်းပညာဆိုင်ရာ ကန့်သတ်ချက်များ
| သိုလှောင်မှု | ≤-၁၈ ℃ |
| သက်တမ်း | ၁၂ လ |
| နမူနာအမျိုးအစား | လူ့ပါရာဖင်ထည့်သွင်းထားသော ရောဂါဗေဒဆိုင်ရာ အပိုင်းများ |
| CV | ≤၅.၀% |
| လိုဒီ | (က) K-ras Reaction Buffer A နှင့် K-ras Reaction Buffer B တို့သည် 3ng/μL wild-type background အောက်တွင် 1% mutation rate ကို တည်ငြိမ်စွာ ထောက်လှမ်းနိုင်သည်။ (ခ) 1×10 mutation3မိတ္တူများ/mL ကို 1×10 ၏ wild-type နောက်ခံတွင် တည်ငြိမ်စွာ ထောက်လှမ်းနိုင်သည်။5မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုနှုန်း 1% ဖြစ်သောအခါ မိတ္တူများ/mL; c) ကုမ္ပဏီ LoD ရည်ညွှန်း SW3 ကို စမ်းသပ်သောအခါ၊ Reaction Buffer A နှင့် Reaction Buffer B တွင် Ct တန်ဖိုး သို့မဟုတ် Ct တန်ဖိုး=0 မရှိပါ။ |
| သက်ဆိုင်သောတူရိယာများ | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR စနစ်များ၊ Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR စနစ်များ၊ QuantStudio®5 Real-Time PCR စနစ်များ၊ LightCycler® 480 Real-Time PCR စနစ်၊ BioRad CFX96 Real-Time PCR စနစ်။ |
အလုပ်စီးဆင်းမှု
ဓာတ်ကူပစ္စည်း လိုအပ်သော်လည်း မပေးထားပါ-DNase/RNase ကင်းစင်သော ရေ၊ ရေဓာတ်မပါသော အီသနော။ ပါရာဖင်ထည့်သွင်းထားသော တစ်ရှူးနမူနာကို စမ်းသပ်သည့်အခါ Tiangen Biotech(Beijing) Co., Ltd မှ ထုတ်လုပ်သော QIAGEN's QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (56404) နှင့် Paraffin-embedded Tissue DNA Rapid Extraction Kit (DP330) ကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။
လိုအပ်သော်လည်း မပေးထားသော စားသုံးနိုင်သောပစ္စည်းများ-DNase/RNase ကင်းစင်သော ထိပ်ဖျားများ၊ တစ်ခါသုံးလက်အိတ်များ၊ DNase/RNase ကင်းစင်သော စင်ထရီဖျူးပြွန်၊ ပြွန် ၈ ခုပါ စတစ်ကာများ၊ စင်ထရီဖျူး။
